組織細(xì)胞固定液經(jīng)一系列的處理后,就必須進行固定,當(dāng)然有的組織是先固定,再進行處理,然后再固定。固定的作用,從組織學(xué)的角度其簡單的定義是,保持細(xì)胞、組織的固有形態(tài)和結(jié)構(gòu),使之盡量保持細(xì)胞、組織的固有形態(tài)和結(jié)構(gòu),而從免疫組化技術(shù)的角度,固定的作用不僅是使細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)凝固,盡量減少或終止外源性酶和內(nèi)源性酶的反應(yīng);防止細(xì)胞的自溶,以免使抗原擴散至組織間質(zhì);以保持組織的固有形態(tài)和結(jié)構(gòu);更重要的是保持組織或細(xì)胞的抗原性,不但要使抗原不導(dǎo)致失活,而且不使抗原發(fā)生彌散的現(xiàn)象,才能在免疫組化染色時,不產(chǎn)生過深的背景,影響對陽性物的判斷。
組織細(xì)胞固定液目的和機制是:
①使蛋白質(zhì)凝固,終止或減少分解酶的作用,防止自溶,保存組織、細(xì)胞的離體前結(jié)構(gòu)狀態(tài),包括保存組織或細(xì)胞的抗原性,使抗原不失活,不發(fā)生彌散。
②保存組織、細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、脂肪、糖原、某些維生素及病理性蓄積物,維持病變的特異性特征。
③使上述物質(zhì)轉(zhuǎn)為不溶解狀態(tài),防止和盡量減少制片過程中人為的溶解和丟失。
④起助染作用。
組織細(xì)胞固定液有很多的優(yōu)點:
1.組織收縮較少,損傷少,保存固有物質(zhì)好.
2.固定均勻,穿透力強.
3.能使組織硬化,增進組織彈性,有利于切片.
4.能保存脂肪及脂類物質(zhì).
5.成本較低.