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CDCFDA, SE 活細(xì)胞熒光示蹤探針CDCFDA, SE

產(chǎn)品信息

活細(xì)胞熒光示蹤探針CDCFDA, SE  

 產(chǎn)品描述

活細(xì)胞熒光示蹤探針 CDCFDA, SE [5-(and-6)-Carboxy-2’,7’-dichlorofluorescein diacetate, succinimidyl ester]已被廣泛證實(shí)，用CDCFDA 活細(xì)胞綠色熒光探針標(biāo)記細(xì)胞能有效確定總細(xì)胞的數(shù)量和一個(gè)樣本中存在多少活細(xì)胞。流式細(xì)胞術(shù)結(jié)合熒光染色法是分析非均質(zhì)細(xì)胞種群的有力工具。

FDA 和它的衍生物無熒光分子進(jìn)入細(xì)胞后被胞內(nèi)無特異性的酯酶所水解產(chǎn)生熒光。這些熒光產(chǎn)物只能積聚在具有完整細(xì)胞膜的細(xì)胞中。因此，死細(xì)胞無完整細(xì)胞膜不能被染色。FDA 具備精que地膜轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)力學(xué)和胞內(nèi)水解作用或者類似物（CDCFDA）相關(guān)的細(xì)胞功能，因此可以通過熒光顯微鏡或者流式細(xì)胞儀來檢測 FDA 標(biāo)記的細(xì)胞。過 FDA 熒光標(biāo)記的細(xì)胞在細(xì)胞系或者菌株中存在變化，可能是由于不同胞內(nèi)酯酶的活性所造成的?；罴?xì)胞熒光示蹤探針 CDCFDA, 琥珀酰亞胺酯是一個(gè)胺化 FDA 衍生物，可以用來制備各種 FDA偶聯(lián)物。

產(chǎn)品屬性

英文名字： CDCFDA， SE [5-（and-6）-Carboxy-2’，7’-dichlorofluorescein diacetate， succinimidyl ester] 

中文名稱： 活細(xì)胞熒光示蹤探針CDCFDA， SE

分子量：626.35

光譜特性：光譜學(xué)相關(guān)參數(shù)為Ex=504nm / Em=529nm

儲(chǔ)存條件：4℃，避光半年，-20℃，避光長期保存

操作說明 

細(xì)胞制備與染色

*的染色探針濃度取決于不同的應(yīng)用程序類型，此處建議的初始條件是基于驗(yàn)證的特定細(xì)胞類型，具體實(shí)驗(yàn)中應(yīng)摸索加以調(diào)整。測試建議至少十倍的濃度范圍內(nèi)。一般情況下，長期染色（3 天以上）或者快速分裂的細(xì)胞使用需要 5~25μM 的染料。更短的實(shí)驗(yàn)，如生存能力分析，可以采用 0.5~5μM。為了減少毒性負(fù)荷，選擇盡可能低的染料濃度。

1.1 用高品質(zhì) DMSO 溶解染料至終濃度為 10mM 儲(chǔ)液，儲(chǔ)液添加至無血清培養(yǎng)基中，保持終濃度

在 0.5~25μM 的工作濃度，孵育溫度為 37 度。

1.2 對(duì)于懸浮細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)到所需要求，即可離心收集細(xì)胞，棄上清，用預(yù)熱的染色輕柔重

懸，在細(xì)胞的生長條件下孵育 15~45分鐘后，離心。對(duì)于貼壁細(xì)胞，當(dāng)達(dá)到合適匯合度后，去掉培養(yǎng)基，更換以預(yù)熱的染色液，在細(xì)胞的生長條件下孵育 15~45 分鐘。

1.3 更換新鮮預(yù)熱的培養(yǎng)基，37 度另外孵育 30 分鐘，以保證胞內(nèi)酯酶充分水解。

1.4 吸取 5μL 的染色菌液至載玻片上，加蓋 18mm 正方形蓋玻片，熒光顯微鏡觀察。

1.5 如需進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)分析，可以收集細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞密度在 106/mL，按懸浮細(xì)胞孵育標(biāo)記方法之

后，上流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析。

注意事項(xiàng)

用途：本品僅供科研，不得用于其它用途
為了您的an全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。